基于AhsA蛋白的嗜水氣單胞菌特異性抗體的制備與鑒定

劉爽; 張澤林; 李麗婷; 胡永超; 許永斌; 權春善 大連民族大學生命科學學院; 遼寧大連116005

關鍵詞:嗜水氣單胞菌 ahsa蛋白 多克隆抗體 

摘要:選取嗜水氣單胞菌表面特異性抗原蛋白AhsA,構建了pET-28a(+)-AhsA表達載體,并在大腸桿菌BL21中進行表達,利用Ni-NTA親和層析、凝膠過濾層析等蛋白純化方法進行純化。重組蛋白表達效果較好,濃度可達10mg·mL^-1,純度可達90%以上,符合制備多克隆抗體的免疫原標準。利用WesternBlot技術將AhsA抗體特定識別免疫原蛋白,結果表明該抗體能夠特異性識別免疫原蛋白AhsA,而對于牛血清蛋白卻不能發生免疫應答,表明該抗體具有一定的特異性且AhsA蛋白具有很好的免疫原性。同時通過檢測驗證了AhsA蛋白抗體能夠特異性檢測嗜水氣單胞菌,將為水產品質量控制及臨床檢測嗜水氣單胞菌可提供新的技術。

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