基于RNAi和蛋白質(zhì)組學(xué)研究膠孢炭疽菌CgCDC2基因的功能

夏楊; 蘇初連; 葉子; 劉曉妹; 蒲金基; 張賀 海南大學(xué); ???70228; 中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院環(huán)境與植物保護(hù)研究所·農(nóng)業(yè)農(nóng)村部熱帶作物有害生物綜合治理重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室·海南省熱帶農(nóng)業(yè)有害生物監(jiān)測(cè)與控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室; ???71101

關(guān)鍵詞:杧果 膠孢炭疽菌 cdc2 rnai tmt蛋白質(zhì)組學(xué) 

摘要:【目的】CDC2是調(diào)控細(xì)胞周期的主要因子之一,對(duì)植物病原菌的生長(zhǎng)發(fā)育有著重要作用,但目前還未有膠孢炭疽菌CDC2蛋白生物學(xué)功能方面的研究。本試驗(yàn)的目的是獲得膠孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)CgCDC2的RNAi突變體菌株,并分析CgCDC2基因的功能。【方法】利用RNAi技術(shù)和PEG介導(dǎo)法獲得CgCDC2的RNAi突變體菌株,通過表型分析、TMT蛋白質(zhì)組學(xué)分析和酶活性測(cè)定來確定該基因的生物學(xué)功能?!窘Y(jié)果】通過PCR擴(kuò)增獲得CgCDC2基因,編碼一個(gè)326個(gè)氨基酸的蛋白,其RNAi突變體菌株與野生型相比,生長(zhǎng)速率減緩、分生孢子產(chǎn)量顯著下降、對(duì)H2O2敏感性增強(qiáng),PG、PL蛋白質(zhì)含量、基因相對(duì)表達(dá)量和酶活性均顯著降低,致病力減弱。【結(jié)論】CgCDC2參與調(diào)控膠孢炭疽菌的生長(zhǎng),分生孢子產(chǎn)量,氧化應(yīng)激反應(yīng)以及PG、PL的酶活性,從而降低病原菌的致病力。

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