關鍵詞:體細胞核移植 卵泡抑制素 骨骼肌特異表達載體 肌肉 轉fst基因絨山羊
摘要:高產優質肉用家畜新品種的培育是家畜育種的工作目標之一,體細胞核移植技術和基因編輯技術的發展為新品種家畜的培育提供了快速便捷的新方式.本研究將骨骼肌特異表達卵泡抑制素(Follistatin,FST)的pCDsRed2-SP-FST重組質粒轉染山羊胎兒成纖維細胞,通過G418篩選獲得穩定轉染的陽性供體細胞系,將供體細胞注入去核成熟卵母細胞獲得FST基因編輯重構胚胎425個,胚胎移植到59個受體母羊,出生羔羊4只,其中1只羔羊存活至今.利用PCR、Southern Blot、Western Blot和qPCR等技術在分子生物學水平鑒定該羊羔,發現FST基因被成功插入到山羊基因組中并可在肌肉組織中過表達,而且FST基因的過表達可使肌肉標志基因MSTN和BMP4的表達增強.羔羊健康分析表明轉FST基因絨山羊各項生理指標與野生型相比并無明顯差異,但FST基因的過表達增加了肌纖維的直徑和密度.該FST基因過表達絨山羊的成功獲得為高產優質肉用家畜新品種的培育奠定了研究基礎.
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