關鍵詞：蔗糖磷酸化酶 酶學性質 分子改造 轉糖苷 

摘要：【背景】蔗糖富集土壤是蔗糖磷酸化酶的重要來源之一。此酶能以較廉價的蔗糖為底物進行轉葡萄糖基反應,改善受體底物的理化性質,因而具有重要的應用價值。【目的】研究蔗糖富集土壤中蔗糖磷酸化酶的酶學性質和轉糖苷活性,為其更優(yōu)質的改造提供材料和理論基礎?！痉椒ā繉⒑昊蚪M中獲得的蔗糖磷酸化酶基因克隆到表達載體上構建重組大腸桿菌,誘導表達并進行鎳親和層析純化蛋白。以蔗糖為底物測量重組酶的基本酶學性質,研究其對糖類底物的轉糖苷活性。通過底物通道分析,利用反向PCR技術對其第155位點進行飽和突變,并測定突變體基本酶學性質和轉糖苷活性。【結果】純化的酶蛋白分子量大小約為56 kD,活性狀態(tài)時以三聚體形式存在。在以蔗糖為底物時,最適溫度和最適pH值分別為55°C和6.5;Km和Vmax值分別為23.1±2.4 mmol/L和407.9±8.5μmol/(mg·min),對第155位點進行了定點飽和突變,獲得了部分酶學性質或轉糖苷活性改善的突變體?！窘Y論】宏基因組中蔗糖磷酸化酶的研究豐富了酶學數(shù)據(jù),并通過分子改造獲得了部分性質更優(yōu)的突變體,為轉糖苷活性關鍵氨基酸的研究和該酶的工業(yè)應用奠定了基礎。

微生物學通報雜志要求:

{1}來稿研究內容如屬各級基金資助項目，須在首頁腳注標明其名稱，并注明編號。

{2}來稿應嚴謹遵守學術規(guī)范，內容表述清晰，語言流暢通達，邏輯嚴密。

{3}內文的圖、表，請按規(guī)范要求繪制，并標明圖序、表序、圖題、表題。

{4}注釋：是作者對文章某一內容或詞語的必要解釋或說明，其內容或詞語應以加圈數(shù)字的上標形式順序標出，注釋性文字按順序置于參考文獻之前。例：機聯(lián)網(wǎng)絡①。

{5}正文文字請用宋體五號；獨立引文用仿宋五號（起四回二）。

注：因版權方要求，不能公開全文，如需全文，請咨詢雜志社