大腸桿菌O157:H7熒光納米顆粒試紙條的研制

范放 朱海 洪小柳 黃李華 劉慧玲 馬淑棉 宋志強(qiáng) 深圳出入境檢驗(yàn)檢疫局食檢中心 深圳518067

關(guān)鍵詞:螯合物 納米顆粒 免疫層析試紙條 

摘要:建立大腸桿菌O157:H7熒光納米顆粒免疫層析法。方法:首先將熒光納米顆粒與大腸桿菌O157:H7單抗共價(jià)偶聯(lián),制成大腸桿菌O157:H7單抗-熒光納米顆粒偶聯(lián)物。用該偶聯(lián)物代替金標(biāo)顆粒,以雙抗體夾心作為反應(yīng)模式來制備大腸桿菌O157:H7免疫層析試紙條。在紫外燈下觀察免疫層析試紙條上經(jīng)免疫反應(yīng)而產(chǎn)生的質(zhì)控線和檢測(cè)線上的熒光信號(hào),并利用熒光強(qiáng)度來半定量檢測(cè)大腸桿菌O157:H7。結(jié)果:用所制備的試紙條對(duì)11屬24種54株菌進(jìn)行檢測(cè),所有27株大腸桿菌O157:H7的檢測(cè)結(jié)果呈陽性.其它非大腸桿菌O157菌株檢測(cè)結(jié)果呈陰性。用該試紙條檢測(cè)人工污染的雞肉樣品。靈敏度為2.7×10^4CFU/mL。通過觀察檢測(cè)線的有無。可對(duì)大腸桿菌O157:H7進(jìn)行半定量檢測(cè)。分別用所制備的大腸桿菌O157:H7免疫層析試紙條和標(biāo)準(zhǔn)法檢測(cè)57份樣品,2種方法的總符合率為80.7%。結(jié)論:大腸桿菌O157:H7熒光納米顆粒檢測(cè)試紙條的研制成功,為大腸桿菌O157:H7的快速檢測(cè)提供了一個(gè)極好的檢測(cè)方法.便于野外檢測(cè)的開展.具有廣闊的應(yīng)用前景。

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