關鍵詞:胰島素 結腸 肌 平滑 干細胞因子
摘要:目的探討胰島素(Ins)促進結腸平滑肌細胞(SMC)表達干細胞因子(SCF)的細胞內信號傳導途徑。方法分離培養SD大鼠結腸SMC,采用a-actin免疫熒光鑒定。分3大組進行實驗。①Ins濃度梯度組:SMC添加不同濃度Ins(0、2.5、5、20、40和80mg/L),培養16h。②Ins時間梯度組:SMC+Ins(40mg/L),分別培養0、8、16和24h。③信號通路阻斷組:SMC加LY-294002或PD-98059預處理后,再予以40mg/L的Ins誘導16h。四甲基偶氮唑鹽(MTT)法檢測結腸SMC增殖情況,Western印跡和反轉錄PCR檢測SCF的變化。結果①Ins在5mg/L濃度即能顯著促進SMC增殖,其效應與20、40和80mg/L時差異無統計學意義(P值均d0.05)。②與未添加Ins組(即空白對照組)比較,低中劑量Ins(2.5、5和20mg/L)即有促進結腸SMC表達SCFmRNA和SCF蛋白的作用(P〈0.05),這種作用在Ins40mg/L時達到最大(P〈0.05),80mg/L時與40mg/L時差異無統計學意義(P〉0.05)。③與0h時相比,40mg/L的Ins作用于SMC8h后SCF表達增加(P〈0.05),16h后達峰值(P〈0.05),24h與16h差異無統計學意義(P〉0.05)。④與空白對照組和溶劑對照組相比,LY-294002、PD-98059處理16h,均能減少Ins誘導的SCF的表達(P值均〈0.05)。結論Ins能促進SMC增殖;在一定范圍內呈劑量與時間依賴性誘導結腸SMC合成SCF,該效應可能與PI3K與MAPK兩條信號通路有關。
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