細胞培養(yǎng)氨基酸穩(wěn)定同位素標記-質譜技術測定槲皮素對人肝癌細胞熱休克蛋白表達的影響

周進 方麗 姚文秀 趙新 魏陽 周行 謝華 王理揚 陳俐娟 四川省腫瘤醫(yī)院腫瘤內科 成都610041 成都醫(yī)學院第·附屬醫(yī)院消化內科 四川人學華西醫(yī)院腫瘤中心

關鍵詞:槲皮素 hepg2細胞 熱休克蛋白 

摘要:目的觀察槲皮素對人肝癌細胞HepG2中熱休克蛋白(HSP)發(fā)達的影響,為其抗腫瘤活性探尋可能的靶點。方法經過連續(xù)傳代,充分氚化HepG2細胞中的亮氨酸,并鑒定其標記率。采用四早基偶氮唑藍(MTT)法檢測槲皮素對HepG2細胞中的亮氨酸,并鑒定其標記率。采用四早基偶氮唑藍(MTT)法檢測槲素對HepG2細胞生長的抑制活性及有效濃度。以50μmol/L槲皮素作用氚化HepG2細胞45h后,與正常HepG2細胞按1:1等量混合電泳,提肽后時行質譜鑒定,將獲得的肽片段數據進行Mascot檢索。結論SILAC-MS成熟可靠,能全面定量分析外因作用前后HepG2細胞中全系列蛋白譜的變化,槲皮素對HepG2細胞中HSP表現出強烈的抑制能力,并且這種作用可能是其發(fā)揮腫瘤活性的途徑之一。

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